技術文章
新聞資訊
INFORMATION CENTER
新聞資訊 技術文章 無菌檢測條件要求有哪些？無菌檢查的菌種如何管理？
無菌檢測條件要求有哪些？無菌檢查的菌種如何管理？
  • 48次
  • 2024-09-18
  • 來源：中科檢測

    無菌檢查是將供試品或其浸提液接種于培養基內，以檢驗供試品是否有微生物污染。無菌檢查應在隔離器系統或B級背景下的A級單向流潔凈區域中進行，其全過程應嚴格遵守無菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。


    無菌檢測條件要求


    1、進行產品的無菌檢查法時，應進行方法適用性驗證，以證明所采用的方法適合于該產品的無菌檢查。若該產品的組分或原檢驗條件發生改變時，檢查方法應重新驗證。


    2、測試菌種：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉。


    3、培養基適用性檢查：


    硫乙醇酸鹽流體培養基（FTM）：主要用于厭氧菌的培養，也可用于需氧菌的培養；


    胰酪大豆胨液體培養基（TSB）：用于真菌和需氧菌的培養。


    每批培養基隨機不少于5支（瓶），置各培養基規定的溫度培養14天，應無菌生長。


    4、方法適用性試驗：進行產品無菌檢查時，應進行方法適用性試驗，以確認所采用的方法適合于該產品的無菌檢查。若檢驗程序或產品發生變化可能影響檢驗結果時，應重新進行方法適用性試驗。可與供試品的無菌檢查同時進行。無菌檢查法包括薄膜過濾法和直接接種法。


    無菌檢驗的菌種管理要求


    微生物實驗室無菌檢驗的菌種管理必須制定相應的規程和操作流程，其中包括目的、范圍、職責（采購的入庫記錄、支出的領取記錄）、使用記錄（復蘇、傳代、使用、接種、保藏、銷毀等記錄）、檢測人員、批準人員等。


    拿黑曲霉的制備來舉例：用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液把黑曲霉的孢子新鮮培養物進行10倍遞增稀釋，選擇三個或者三個以上適合稀釋劑進行傾注或涂布至沙氏葡萄糖瓊脂培養基上，在20℃～25℃溫度下培養5到7天，并且進行計數。制成符合規定的小于100cfu的孢子懸液。孢子懸液需放置于4～8℃的冰箱冷藏保存，可以在驗證過的儲存期之內使用，也可以將孢子懸液采用甘油1:1等體積混合于離心管中，在-20℃的冰箱里保存，在一年之內都可使用。


    而車間的無菌檢驗要查看的是微生物室和無菌室的環境清潔度的參數是否在合格范圍以內，其中需要檢測：溫濕度，風速、換氣次數、靜壓差、塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等等。


    防護服的無菌檢驗方法則是按照2020版《中國藥典》中直接接種的方法，按表2取規定檢驗的數量，再按照《中國藥典》1101中表3里的第三例醫療器械外科敷料規定量的要求。取相應劑量的供試品，來進行無菌操作，打開每個供試品，并剪去產品的代表性部分，取最少檢驗規定量約1*3cm大小，分別等量接種FTM和TSB兩種培養基，進行培養、觀察以及結果判定。


    總的來說，無菌檢驗方法主要是對照組與含供試品的試驗菌都生長良好，就表明供試品的檢驗劑量于檢驗條件之下是沒有抑菌作用，或者說它的抑菌作用是可以忽略不計的。